冰凍切片脂質(zhì)蘇丹黑染色試劑盒產(chǎn)品說明書

主要用途

 冰凍切片脂質(zhì)蘇丹黑染色試劑是一種旨在通過脂溶性偶氮染料蘇丹黑 B 特異性地使組織內(nèi)中性 甘油三脂、脂質(zhì)以及脂蛋白顯示藍黑色，來分析固定處理的組織細胞樣本中脂質(zhì)狀況的而經(jīng)典的技術(shù) 方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種冰凍切片的人體和動物組織樣本。 用于成脂細胞定性、細胞病理學(xué)分析(脂質(zhì)細胞瘤； LIPOID) 等研究。產(chǎn)品即到即用， 操作簡捷， 性能穩(wěn) 定，著色清晰。

技術(shù)背景

脂類物質(zhì)(LIPIDS) 是一類脂溶性(疏水性)的自然分子，包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘油 一脂、二脂、三脂和磷脂， 以及其它固醇類(STEROL) 物質(zhì)，例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機體中具有能量 儲存的作用， 是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細胞信號分子。蘇丹黑 B (SUDAN BLACK B)，又稱為二氫二 基偶氮萘偶氮嵌間二氮雜苯(2 ，3－dihydro－2 ，2－dimethyl－6－(4－phynylazo)－1－naphthyl) azo ) 1H－perimidine)，是一種脂溶性偶氮染料(LYSOCHROME DIAZO DYE)。其分子式為 C26H24N4O，分子 量為 408.51 。染色顯示組織細胞脂類物質(zhì)呈藍黑色。

產(chǎn)品內(nèi)容

 清理液(Reagent A)

 固著液(Reagent B)

 脫水液(Reagent C)

 染色液(Reagent D)

 澄清液(Reagent E)

產(chǎn)品說明書

保存方式

毫升

毫升

毫升

毫升

毫升

1 份

保存在 4℃冰箱里；  染色液(Reagent D)，避免光照；有效保證 6 月

用戶自備

核固紅復(fù)染試劑盒(40011)：用于常規(guī)染色后復(fù)染

經(jīng)典水相封片液(12146)：用于染色后封片處理

溫箱：用于試劑預(yù)熱或保存

小型染色缸：用于組織細胞染色操作

光學(xué)顯微鏡：用于組織細胞染色后觀察分析

實驗步驟

實驗開始前，將  染色液(Reagent D) 置于 60℃溫箱里預(yù)熱，避免光照。然后進行下列操作。

一、  樣本固著處理

1．  取出待測的 5 至 10 微米厚的冰凍切片(注意：使用快速冰凍 snap－frozen 處理，不宜使用包埋處理)

2．  小心加上 xx 微升  清理液(Reagent A) 在切片上，鋪滿整個樣品表面

3．  小心移去切片上的  清理液(Reagent A)

4．  小心加上 xx 微升  固著液(Reagent B)，鋪滿整個樣品表面

5．  室溫下，孵育 10 分鐘

6．  小心移去切片上的  固著液(Reagent B)

7．  小心加上 xx 微升  清理液(Reagent A)，清洗樣品表面

8．  小心移去切片上的  清理液(Reagent A)

9．  重復(fù)實驗步驟 7 至 8 一次

二、樣本染色處理

1．  小心加上 xx 微升  脫水液(Reagent C) 在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

2．  室溫下靜置 5 分鐘

3．  小心移去切片上的  脫水液(Reagent C)

4．  重復(fù)實驗步驟 10 至 12 一次

5．  小心加上 xx 微升  染色液(Reagent D)，鋪滿整個切片樣品表面

6．  室溫下靜置 7 分鐘；或直至可見藍黑色

7．  小心移去切片上的  染色液(Reagent D)

8．  室溫下，小心將切片置入 xx 毫升  清理液(Reagent A) 中孵育 2 分鐘

9．  輕輕移去切片上的  清理液(Reagent A)

三、  樣本復(fù)染處理

1．  小心加上 xx 微升  澄清液(Reagent E) 在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

2．  室溫下孵育 3 分鐘

3．  小心移去切片上的  澄清液(Reagent E)

4．  室溫下，小心將切片置入 xx 毫升  清理液(Reagent A) 中孵育 2 分鐘

5．  小心移去切片上的  清理液(Reagent A)

6．   (選擇步驟)樣本復(fù)染處理(核固紅)

7．  放上蓋玻片或水相封片(注意： 建議使用  經(jīng)典水相封片液－12146)

8．  即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：脂類物質(zhì)呈現(xiàn)藍黑色(如果復(fù)染則細胞核呈現(xiàn)紅色)

注意事項

1 ．  本產(chǎn)品為 50 次操作

2 ．  操作時，須戴手套

3 ．  所有操作在室溫下進行

4 ．  試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面

5 ．  樣品染色避免過度，肉眼可見藍黑色即可終止染色

6 ．  建議使用  核固紅復(fù)染試劑盒(40011)，增強染色對比度

7 ．  樣品染色完成后，即刻進行光學(xué)顯微鏡觀察

8 ．  封片處理，避免使用有機溶劑類包括乙醇等，而使用水相封片液；建議使用  經(jīng)典水相封片 液(12146)

9 ．  本公司提供系列脂類染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標準

1 ．  本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2 ．  本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰