主要用途

植物細(xì)胞壁鈣熒光白熒光染色試劑是一種經(jīng)典的技術(shù)方法，旨在通過熒光染色劑鈣熒光白與細(xì)胞壁中的纖維素和殼多糖結(jié)合，產(chǎn)生熒光，從而檢測植物細(xì)胞壁的生成變化。該技術(shù)經(jīng)過精心研制和成功實(shí)驗(yàn)證明，可用于顯示植物細(xì)胞壁的生成變化和原生質(zhì)體細(xì)胞的鑒定。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡易，支持活體檢測，性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

鈣熒光白（Calcofluor white；CFW）是一種非特異性熒光增亮染料，能夠結(jié)合β-鏈接的糖苷，如纖維素（cellulose）和殼多糖（chitin）等。在植物生物學(xué)中，鈣熒光白用于顯示藻類和高等植物中細(xì)胞壁生物合成過程中的細(xì)胞壁生成變化，以及原生質(zhì)體細(xì)胞的鑒定。

產(chǎn)品內(nèi)容

• 清理液（Reagent A）：XX毫升

• 染色液（Reagent B）：XX微升

• 產(chǎn)品說明書：1份

保存方式

• 保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，嚴(yán)格避免光照。

• 其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6個月。

用戶自備

• 1.5毫升離心管：用于細(xì)胞染色的容器

• 微型臺式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞

• （共聚焦）熒光顯微鏡：用于觀察熒光細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 準(zhǔn)備1管待測植物細(xì)胞或原生質(zhì)體細(xì)胞（1 × 10^7細(xì)胞/毫升）。

2. 移取100微升懸浮細(xì)胞到1.5毫升離心管。

3. 加入XX微升染色液（Reagent B），混勻。

4. 室溫下孵育5分鐘，避免光照。

5. 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g。

6. 小心抽去上清液。

7. 加入XX微升清理液（Reagent A），輕柔混勻細(xì)胞顆粒群。

8. 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g。

9. 小心抽去上清液。

10. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟7至9二次。

11. 加入XX微升清理液（Reagent A），輕柔混勻細(xì)胞顆粒群。

12. 移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上，蓋上蓋玻片。

13. 使用（共聚焦）熒光顯微鏡觀察：激發(fā)波長355nm，散發(fā)波長440nm——細(xì)胞壁顯示強(qiáng)烈藍(lán)色熒光。

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品為20次操作。

2. 操作時，須戴手套。

3. 操作時，須無菌操作，避免污染母液。

4. 孵育時，必須避免光照。

5. 建議細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行細(xì)胞熒光分析。

6. 本公司提供系列植物細(xì)胞分析試劑產(chǎn)品。

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定。

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰。