主要用途

 組織乙酰輔酶A羧化酶（ACETYL-COA CARBOXYLASE）活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后，進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測(cè)定產(chǎn)生ADP過(guò)程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反應(yīng)， 即采用光度法測(cè)定其氧化后峰值的變化，以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或*純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測(cè)，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，高度敏感。

技術(shù)背景

乙酰輔酶A羧化酶（Acetyl CoA Carboxylase；ACC；EC6.4.1.2），又稱(chēng)為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶（Acetyl CoA：bicarbonate ligase-ATP），是ATP依賴(lài)性含生物素酶，參與脂肪酸生物合成。哺乳動(dòng)物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225－250Kd，含有許多磷酸化位點(diǎn)，以及1個(gè)生物素輔基位點(diǎn)、2個(gè)催化位點(diǎn)和1個(gè)異構(gòu)（allosteric）位點(diǎn)。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基（prosthetic group）的羧基化反應(yīng)，然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上，產(chǎn)生丙二酰輔酶A（malonyl CoA），成為長(zhǎng)鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶（AMP-Activated Kinase；AMPK）調(diào)節(jié)該酶的活性，而十四烷基氧糠酸（5-(tetradecyloxy)-2-furoic acid；TOFA）抑制該酶的活性。基于底物乙酰輔酶A（acetyl CoA）和碳酸氫鹽，在ATP的存在下，受到乙酰輔酶A羧化酶的催化，獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP，進(jìn)而通過(guò)丙酮酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其吸光峰值的變化（340nm），來(lái)定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為：

Acetyl CoA Carboxylase

Acetyl Co-A  +  ATP  +  HCO3  →  Malonyl CoA  +  ADP  +  Pi

pyruvate kinase

Phosphoenolpyruvate  +  ADP       →      pyruvate  +  ATP

lactate dehydrogenase

pyruvate  +  NADH       →      lactate  +  NAD+

           （高吸收峰） （低吸收峰） 

產(chǎn)品內(nèi)容

 清理液（Reagent A）         60毫升

 裂解液（Reagent B）         10毫升

 緩沖液（Reagent C）   20毫升

 酶促液（Reagent D）   2毫升

 反應(yīng)液（Reagent E）   2毫升

 底物液（Reagent F）         2毫升

 陰性液（Reagent G）   500微升

 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)   1份

保存方式

保存 清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；有效保證6月

用戶自備

1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品處理的容器

DOUNCE勻漿器：用于裂解組織

（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品預(yù)處理

1厘米光徑比色皿或96孔板：用于光度分析操作的容器

分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于樣品光度分析